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常見問題

  • 做Western時,可以一次用兩種抗體嗎?
  • 做Western時,如果想同時使用兩種一抗,或是同時使用兩種二抗(anti-mouse/anti-rabbit), 理論上是可以的。許多研究人員在重覆用某些已經很熟悉的抗體,也常常這樣使用。

    不過,如果對手上的一級抗體還不熟悉,或是它的單價較高,為了避免抗體之間cross linking, 使得鍵結能力都下降,還是建議不要這麼使用。

    這時候,如果想看同一個membrnae上的不同蛋白,常見的方法有以下兩種:

    1. 切開membrance:對於知道大小的蛋白質,可以用切開membrance, 分別加入不同一抗的方式來呈色。

    2.  使用適合的Stripping buffer:Stripping buffer可以切開membrance上一抗和蛋白質之間的鍵結,讓membrance回復到沒加上一抗的狀態。如此一來,研究人員又可以加入另一種抗體,觀察另一種蛋白的表現情況。使用Stripping buffer的過程中,多少會沖洗掉membrance上的蛋白,所以stripping buffer的強度不能太強(太強會洗掉過多membrance上的蛋白),又不能太弱(太弱會無法切斷一抗和蛋白之間的鍵結)。

    相關產品連結:
    1Stripping Buffer for Western Blot : 塞魯士實驗室自行研發的stripping buffer,客戶反應極佳,既能洗掉一抗,又不傷害membrnace上的蛋白,可以stripping 2~3次。
    2. CyECL Western Blotting Substrate L塞魯士實驗室自行研發的ECL,適用於一般ECL實驗。反應時機準確,低背景值。
    3. CyECL Western Blotting Substrate M:塞魯士實驗室自行研發的ECL,用於蛋白質的量較少的ECL實驗。
    4. CyECL Western Blotting Substrate H塞魯士實驗室自行研發的ECL,用於蛋白質的量極少的ECL實驗。此種ECL的背景值極低,即便曝光到數分鐘,仍不會有雜訊,因此對於偵測極小量蛋白質的ECL實驗。
    *此上產品皆為塞魯士自行研發,效果卓著,價格又比一般市價低,為您節省實驗經費。備有試用品,歡迎索取試用。

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