常見問題
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CCK-8試劑(細胞計數工具)使用上常見問題
底下是CCK-8在實務上常見的問題，在此整理給大家：
1. 如可設定空白對照組？
A: 在不含細胞的培養基中，加入CCK-8, 測定450nm的吸光度做對照組。在細胞毒性試驗中，還要考慮藥物的吸收，所以還會在培養基中加入藥物，再測定450nm的吸光度。
2. 哪些物質會影響CCK-8的測定？
A: 當有還原劑存在時，會增加OD值；相反的，在有氧化劑存在時，會降低OD值。除此之外，大部份的養細胞藥品都不會影響CCK-8的測定。另外，在有酚紅存在時，會增加空白吸收，但這不影響實驗測定，只要使用對照組，扣掉空白吸收即可。
3. 如果沒有450nm的濾光片，可以用其他的濾光片嗎？
A: 還可以使用430nm~490nm之間的濾光片，但450nm濾光片的靈敏度最高。
4. 可以使用CCK-8對細胞染色嗎？
A: 不能。因為CCK-8的主要成份是水溶性的WST-8, 它是通過electron mediator(1-methoxy PMS)將活細胞中的電子交換到培養基中。因為WST-8及生成的WST-8 forzan是高度水溶性的，不會進入細胞中，所以無法使用CCK-8對細胞染色。
5. CCK-8對於貼壁和懸浮細胞的靈敏度一樣嗎？
A: 不一樣。懸浮細胞相較於貼壁細胞較難呈色。一般加入CCK-8 1~4小時後吸光值已經很高了，但對於懸浮細胞的培養基可能較低，這時候可以通過延長CCK-8染色時間來解決這個問題。
6. 每次都要做標準曲線嗎？
A: 建議每次都做。雖然CCK-8很靈敏，實驗數據效果也很穩定，但每種細胞的型態、形狀略有不同，所以還是建議每次都要做標準曲線。
7. 有時在藥物作用下，細胞已經死亡，但去氫酶的活性還在，是否會影響檢結果？
A: 會。因為CCK-8主要是靠著去氫酶的活性來呈色的，所以只要去氫酶的活性還在都會造成CCK-8呈色。建議再放置一陣子，等死細胞的去氫酶失去活性了，再進行檢測。
8. 如果加入的藥物中有重金屬，是否會影響結果？
A: 重金屬會影響CCK-8的檢驗效果。當藥物中最終濃度含有1mM氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅，分別會抑制5%、15%、90%的顯色反應，使得敏度感度下降。
9. CCK-8可以用來檢測細菌細胞嗎？
A: 可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母菌。檢測大腸桿菌也是在每孔100uL的培養基中加入10uL的CCK-8，培養1~4小時測定。
10. CCK-8的穩定如何？
A: CCK-8在4℃可以保存一年。在-20℃中，可以穩定保持兩年。
更詳細的CCK-8介紹及優惠資訊，請見底下網頁：
http://www.cyrusbio.com.tw/webc/html/news/show.php?num=59&kind=1